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化学发光免疫分析在肿瘤标记物检测上的应用

添加日期:2017-03-09 浏览次数:1639次

      现在,随着社会发展,环境污染及精神压力的加重,给我们的生活带来了更多的健康危机!

在我国,平均每五个死亡人中,就有一人死于癌症,仅广东省每7.5分钟就有一人死于癌症,死亡人群通常在35-54岁的壮年群体。

        为什么肿瘤难以发现,且发现晚?癌症是否真的是不治之症?根据WHO的统计数据指出:肿瘤如果早期查出治愈率达80~95%,中期查出治愈率达20~30%,晚期查出则只能延长生命;由此可见,早发现、早诊断是治愈癌症的关键。但是现代人闻”癌“色变,开玩笑的说:“被癌症吓死的,比得癌症死亡的还多”,虽然夸张了些,也由此看出了人们对癌症的恐惧,那么……难道科学发展的今天,人们对肿瘤就没有办法了吗?答案是……NO,“多肿瘤标记物检测”,医疗检测手段划时代的革命,人类生命科学进程中的里程碑。现在的你是不是在疑问,多肿瘤标记物检测要如何检测,检测什么指标,又和那些疾病有关……


肿 瘤 标 记 物

CLIA

肿瘤标记物是肿瘤细胞本身存在或分泌的特异性物质。应具备的特征:

1、必须由恶性肿瘤细胞产生,可在血液、组织液、分泌液或肿瘤组织中测出

2、不应存在于正常组织和良性疾病中

3、某一肿瘤的肿瘤标记物应在该肿瘤的大多数患者中检测出来

4、临床尚无明确肿瘤证据之前能测出

5、肿瘤标记物的量能反映肿瘤的大小

6、在一定程度上能有助于估计治疗效果、预测肿瘤的复发和转移。


理想的肿瘤标记物应符合上述各项特征。但是,在现今所知的肿瘤标志物中,绝大多数不仅存在于恶性肿瘤中,也存在于良性肿瘤、胚胎组织,甚至正常组织中。因此,这些肿瘤标记物并非恶性肿瘤的特异性产物,但在恶性肿瘤患者中明显增多。所以有人将肿瘤标记物称为肿瘤相关抗原。


肿瘤标记物的分类:

  • 糖脂类:癌抗原15-3、癌抗原125、癌抗原19-9、癌抗原50、癌抗原72-4等;

  • 激素类:人绒毛膜促性腺激素、降钙素等;

  • 酶类:前列腺酸性磷酸酶、神经元特异性烯醇化酶等;

  • 蛋白质类:甲胎蛋白、癌胚抗原、鳞状上皮细胞抗原、组织多肽抗原、前列腺特异性抗原等;


瘤标记物作为诊断肿瘤的一项重要指标,它的检测对于疾病治疗和预后都具有重要的意义。目前发现的中落标记物已经有100多种,由于大多数情况下体内肿瘤标记物的含量非常低,一般检测方法难以对它进行精确定量。

过去对肿瘤标记物的检测主要用放射免疫分析法,这种方法存在很多缺点,如操作复杂、检测结果不稳定、放射性污染、仪器昂贵等。因此,亟待发展一种新的检测方法对肿瘤标记物进行精确的定量分析。化学发光法检测正好适应了这种需求。

化学发光免疫分析(CLIA)

化学发光法是一种灵敏度非常高的分析方法,将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合,用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析和时间分辨荧光免疫分析之后发展起来的一项最新免疫测定技术。现已广泛应用于检测肿瘤标记物的研究中。

CLIA的优势有哪些……

检测灵敏度高;

    标记物稳定、

         试剂盒有效期长;

              不需要激发光源、

                  仪器设备简单;

                      线性范围宽;

                          受外界的干扰因素少、

                              信噪比高;

                                  成本低、易实现全自动化等;



化学发光免疫分析技术主要由两大体系组成

1、化学反应体系(光子具有能量ε=hν)

2、抗原抗体结合的免疫反应体系



板式化学发光与酶联免疫的对比



板式化学发光

酶联免疫 ELISA

载体

96孔板、不透明

96孔板、透明

底物

发光物质

显色物质

结果检测方法

发光仪检测孔板中物质反应引起光子跃迁而产生的光值变化

酶标仪检测孔板中物质反应产生的颜色变化而产生的吸光度的变化

灵敏度:板式化学发光>酶联免疫法


【艾康CLIA产品】

癌胚抗原(CEA)检测试剂盒(化学发光法)

甲胎蛋白(AFP)检测试剂盒(化学发光法)

总前列腺特异性抗原(tPSA)检测试剂盒(化学发光法)

糖类抗原19-9(CA19-9)检测试剂盒(化学发光法)

糖类抗原125(CA125)检测试剂盒(化学发光法)


不同肿瘤标记物的检测意义:

✄ 甲胎蛋白(AFP)

(1)、原发肝癌80%AFP>400ng/ml,仅20%AFP正常,AFP可早于影像学6-12月出现异常,为肝癌的早期诊断提供重要依据,建议肝硬化患者定期复查AFP。

(2)、病毒性肝炎、肝硬化绝大部分AFP<400ng/ml。

(3)、内胚层癌、畸胎瘤、睾丸癌、卵巢癌、胃癌等伴肝转移者AFP可升高。

(4)、妇女妊娠3个月后,AFP开始升高,7-8个月时达高峰,一般在400ng/ml以下,分娩后3周恢复正常。妊娠期AFP异常升高,要排除胎儿神经管缺损、畸形可能。

✄ 癌胚抗原(CEA)

(1)、CEA升高主要见于结/直肠癌、胃癌、肝癌、肺癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、子宫及子宫颈癌、泌尿系肿瘤等,其他恶性肿瘤也有不同程度的阳性率。

(2)、肝硬化、肝炎、肺气肿、肠道憩室、直肠息肉、结肠炎等良性病CEA可升高。

(3)、癌症越晚期,CEA越高,阳性率越高;腺癌敏感,其次是鳞癌和低分化癌,分化程度越高阳性率越高。

(4)、正常人吸烟者CEA升高。

(5)、癌症病人的胸、腹水、消化液、分泌物中的CEA常升高。

✄ 糖类抗原125(CA125)

(1)、卵巢癌血清CA125升高,阳性率61.4%;治疗有效CA125下降;复发CA125升高先于症状;CA125是判断治疗和复发的良好指标。

(2)、其他非卵巢恶性肿瘤也有一定的阳性率:如宫颈癌、宫体癌、子宫内膜癌43%,胰腺癌50%,肺癌41%,胃癌47%,结/直肠癌34%,乳腺癌40%。

(3)、其他恶性肿瘤,也有不同程度的升高,但阳性率较低:如子宫内膜异位症、盆腔炎、卵巢囊肿、胰腺炎、肝炎、肝硬化等。

(4)、在许多良性和恶性胸、腹水中发现CA125升高。

(5)、早期妊娠,也有CA125升高。

✄ 糖类抗原19-9(CA19-9)

(1)、胰腺癌、胆囊癌,CA19-9明显升高,尤其是胰腺癌晚期的阳性率可达75%,是重要的辅助诊断指标,但早期诊断价值不大。

(2)、胃癌的阳性率50%,结/直肠癌的阳性率60%,肝癌的阳性率65%。

(3)、其他恶性肿瘤也有一定的阳性率:如:乳腺癌、卵巢癌、肺癌等。

(4)、某些消化道炎症CA19-9也有不同程度的升高,如:急性胰腺炎、胆囊炎、肝炎、肝硬化、胆汁淤积性胆管炎等。

✄ 总前列腺特异性抗原(TPSA)

  PSA是前列腺癌的特异性标志物,也是目前公认的唯一具有器官特异性肿瘤标志物。血清TPSA升高一般提示前列腺存在病变(前列腺炎、良性增生或癌症)

  TPSA测定还可用于监测前列腺癌患者或接受激素治疗患者的病情及疗效,90%前列腺癌术后患者的血清TPSA值可降至不能检出的痕量水平,若术后血清TPSA值升高,提示有残存肿瘤。放疗后疗效显著者,50%以上患者在2个月内血清TPSA降至正常。

  正常参考值:0.01~4.0 ng/ml


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